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新品上市 | mRNA体外合成中的加帽神器：Cap1帽类似物

作者：翌圣生物科技（上海）股份有限公司 2022-03-29T11:55 (访问量:4315)

新品上市 | mRNA体外合成中的加帽神器：Cap1帽类似物

众所周知，mRNA的5′端帽子是完整mRNA的重要组成部分。5′端帽子可以保护mRNA免受5′-3′核酸外切酶的切割，进而增强mRNA的稳定性。此外，5′端帽子还是pre-mRNA剪接、多聚腺苷酸化及出核的标识符，CBC（Cap Binding Complex）通过识别5′端帽子结合到mRNA上，而后进一步招募相关的蛋白因子对mRNA进行剪接和多聚腺苷酸化，并协助mRNA出核。当mRNA进入细胞质后，eIF4F（Eukaryotic Initiation Factor 4F）识别5′端帽子而后起始mRNA的翻译。除此之外，5′端帽子结构异常的mRNA将会引起细胞发生抗病毒反应。

图片来源：pexels

由此可见，5′端帽子结构对mRNA的稳定性、有效翻译和降低mRNA的免疫原性至关重要。因此，在mRNA体外合成中，给mRNA加上5′端帽子这一步骤不可或缺。

目前对于mRNA进行加帽主要有两种策略：酶法加帽和共转录法加帽。当使用牛痘病毒加帽酶和2′-O-甲基转移酶对mRNA进行加帽时，可获得天然的Cap1结构，然而，在mRNA的扩大化生产中，酶用量等比增加导致了成本显著上升。此外，由于引入了两个额外的蛋白和底物SAM，总体工艺步骤变得繁琐，并增加了QC 质检项。而共转录法加帽则是在转录起始时就引入帽类似物，而后转录本沿着帽类似物继续延长，转录完成后就可获得带有帽子结构的mRNA，避免了额外蛋白和底物的引入，工艺步骤变得简单。

目前已有3代帽类似物。与第1代帽类似物Cap和mCap相比，第2代帽类似物ARCA能使转录沿着正确的方向进行，使获得的mRNA具有更高的翻译活性，然而，使用ARCA进行共转录产生的是Cap0结构，而含Cap0的mRNA的免疫原性较高。目前帽类似物已经升级到第3代，使用第3代帽类似物进行共转录可以使mRNA获得Cap1结构，含Cap1的mRNA的免疫原性较低，能更好地满足mRNA药物研发需求。

翌圣可为您提供高纯度（纯度≥97%）的第3代帽类似物：Cap1-GAG（结构为m7G(5′)ppp(5′)(2′OMeA)pG）。在体外转录体系中添加Cap1-GAG进行共转录可形成带有天然Cap1结构的mRNA，加帽率高达90%以上。同时翌圣还可为您提供含有3′OMe修饰的第3代帽类似物：Cap1-GAG(3′OMe)（结构为m7(3′OMeG)(5′)ppp(5′)(2′OMeA)pG），给您多一种选择，助力您的mRNA药物研发之路。

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产品名称	货号	规格
Cap1-GAG m7G(5′)ppp(5′)(2′OMeA)pG (100 mM)	10678ES10	10 μL
	10678ES60	100 μL
	10678ES76	500 μL
	10678ES80	1 mL
Cap1-GAG(3′OMe) m7(3′OMeG)(5′)ppp(5′)(2′OMeA)pG (100 mM)	10677ES10	10 μL
	10677ES60	100 μL
	10677ES76	500 μL
	10677ES80	1 mL

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